V - Diagnostic de l'anémie falciforme
L'anémie falciforme est un exemple de maladie génétique bien caractérisée touchant environ 0,25% des américains noirs. Cette maladie est due à une altération de l'hémoglobine, dans laquelle un acide glutamique est substitué par une valine en position 6 de la chaîne béta de la globine (voir ci-dessous). Cette mutation entraîne la disparition d'un site de restriction.
 Exercice_17 | enzyme de restriction: Mst II CC*TNAGG avec N = A, C, G ou T et * représente le site de coupure |
Question
1 - Proposez un protocole pour mettre en évidence les individus atteints d'anémie falciforme.
La mutation provoque l'apparition d'un site de restriction « Mst II »
.
Détection de la mutation par RFLP avec comme marqueur RFLP le couple [enzyme: « Mst II »
- sonde: partie codante du gène].
Autre méthode (AFLP) : à partir de l'ADN génomique du patient, on amplifie un fragment d'ADN avec des amorces choisies de part et d'autre du site « Mst II »
puis on digère le produit amplifié par l'enzyme « Mst II »
.
