III - Analyse de l'expression d'un transgène
On a obtenu plusieurs plantes transgéniques résistantes à un herbicide. Ces différentes plantes transgéniques contiennent des nombres variables d'insertions du gène de résistance à l'herbicide ainsi que des niveaux d'accumulation variables d'ARNm correspondant de ce transgène. On a tracé ci-après le graphe qui donne le niveau d'expression du transgène dans les plantes en fonction du nombre d'insertions de ce transgène.
Question
Par quelle technique a-t-on déterminé le niveau d'accumulation d'ARNm correspondant au transgène dans les plantes transgéniques (nom de la technique, description des étapes) ?
Schématisez le résultat "brut" obtenu en utilisant cette technique pour analyser les plantes transgéniques, résultat à partir duquel le graphe ci-dessus a pu être établi.
Hybridation moléculaire de type northern.
On pourrait imaginer utiliser la RT-PCR quantitative, mais c'est à l'heure actuelle encore une méthode trop "complexe" pour justifier son utilisation dans le contexte décrit.
Pour la description des étapes, voir cours.
Question
Le résultat obtenu sur le graphe ci-dessus vous surprend-il ?
Comment interpréteriez vous ces données ?
"Effet de position" qui "explique" les différences d'expression pour un même nombre d'insertions.
"Co-supression" qui "explique" l'extinction de l'expression des transgènes lorsque le nombre de copies est important.
