Mise en pratique de la PCR

IV - Détermination de la taille optimale des amorces

On détermine la séquence d'une amorce de n nucléotides.

Question

a - Calculez la probabilité qu'une séquence de n nucléotides pris au hasard soit identique à la séquence de l'amorce.

Solution

P = (1/4)^n

« (1/4 puissance n) »

Question

b - Étant donné la taille L et la complexité C du génome d'un organisme, calculez le nombre moyen de fois que l'on peut trouver une séquence identique à la séquence de l'amorce choisie ci-dessus dans le génome de cet organisme.

(on appelle complexité C d'un génome la longueur totale des séquences uniques (non répétées) composant ce génome; L et C sont exprimés en nombre de paires de bases).

Solution

N = 2PC = (1/4)^n.2C

Question

c - Calculez la taille minimale d'une amorce qui ne s'hybriderait qu'à une position dans les génomes suivants :

En pratique, il faut ajouter trois bases à la longueur théorique pour avoir une bonne sécurité car la valeur calculée est une valeur statistique.

Exercice_7
Solution

Taille minimale de l'amorce = LOG(2C) / LOG(4)

Exercice_7 solution
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